2023年12月3日,我院郭峥团队在Cell子刊STAR Protocols杂志上发表了题为“A live imaging protocol for tracking intestinal stem cell divisions in the Drosophila melanogaster pupal midgut”的实验方案文章。该文章提供了果蝇蛹期肠道干细胞活体成像的实施步骤,其中包括果蝇蛹期肠道的详细解剖步骤和干细胞活体成像过程的详细操作说明。
干细胞的分化与癌症、神经退行性疾病、心血管疾病、自身免疫性疾病、遗传性疾病等疾病相关,研究干细胞的分化对理解这些疾病的发病机制及治疗具有重要意义。活体成像可以最直观的反映这一过程,选择适当的干细胞研究系统,并开发相应的活体成像技术,对干细胞的研究具有重要的意义。我们的前期结果发现果蝇蛹期肠道干细胞因谱系清晰、极性明显,是研究细胞不对称分裂的理想体系。然而,由于果蝇蛹期肠道解剖上的困难,以及解剖出的蛹期肠道培养的难度大、易损伤,目前还没有建立起果蝇蛹期肠道干细胞活体成像的方法。
针对上述问题,郭峥团队首创提出一种果蝇蛹期肠道干细胞活体成像技术的实验方案。该方案通过优化解剖及体外培养方案,可以对果蝇肠道进行连续3个小时的活体成像观测,通过跟踪带有荧光标签蛋白的定位,能够在单个干细胞水平上实时记录干细胞分裂过程,以及该过程中细胞极性蛋白在干细胞内表达及定位的动态变化。该方法为研究干细胞的分裂过程提供了理想的工具(图1)。
果蝇蛹期肠道干细胞活体成像的实施步骤
华中科技大学郭峥教授为本文通讯作者。华中科技大学基础医学院博士后武松(现任湖北工业大学讲师)本文共同通讯作者和第一作者。该项研究工作得到了国家自然科学基金和中国博士后基金的资助。